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超高效液相色谱仪

> 知识库 芦荟君 2025-01-04 18:36

高效液相色谱与超高效液相色谱条件有什么差异

原理是一致的。不同的地方一个是仪器,一个是色谱柱。后者超高效液相色谱,可以缩短检测时间,节省时间,节省流动相,大大地提高了效率。先说色谱柱,超高效液相色谱柱的粒径会更小,柱子也更短。如果说样品流过液相色谱柱的感觉是流过满是石头的管路,那么超高效液相色谱柱就是装满了沙子的管路。一般液相色谱柱的粒径是5um,超高效液相色谱柱的粒径有3.5um,3.0um,甚至有1.7um。这样样品和固定相的吸附会更加充分,分离也会很快。再说仪器,刚才说到的满是沙子的管路,因为色谱柱的粒径减小,所以柱压会大大提高。这样普通的液相色谱仪也就不耐受这种高压了。所以超高效液相色谱仪,从泵,到各个管路都是耐高压的。这样可以充分发挥色谱柱的作用,快速分离样品。上面一张图是高效液相色谱图,15min分析出的一个样品。下面一张图是超高效液相色谱图,同一个样品,7min就分析完毕。而且峰型更好。

高效液相是什么原理?

高效液相的原理:液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中.为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中.为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱,因此固定相的粒度不可能太小(100μm~150μm左右)。分离后的样品是被分级收集后再进行分析的,使得经典液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢,而且操作也比较复杂。直到20世纪60年代.发展出粒度小于10μm的高效固定相,并使用了高压输液泵和自动记录的检测器,克服了经典液相色谱的缺点,发展成高效液相色谱,也称为高压液相色谱。扩展资料:高效液相统称为高柱效、高压力、高效率的液相色谱。根据液相色谱原理,对物质进行分离。其原理可采用分配色谱,也可采用吸附色谱等等,其大体结构为:泵(用来输送流动相,即溶剂/洗脱液,A相一般为水溶性溶剂,B相一般为有机溶剂,如乙腈、甲醇等),调节阀(分为单向或双向调节阀),色谱柱(用来分离物质,物质一般加在柱头),检测器(检测物质分离情况,一般可分为紫外,蒸发光散射等等)。根据泵的结构可分为一元泵、二元泵、四元泵等,根据泵的压力可分为低压单元、高压单元等。高效液相色谱法有“四高一广”的特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。⑤应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。⑥柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物⑦样品量少、容易回收:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,但也有缺点,与气相色谱相比各有所长,相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间,除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测池等)中,如果流动相的流型有变化,被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽,柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。参考资料来源:百度百科-液相色谱百度百科-高效液相色谱

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